Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

24 августа 1983 г. N 2872-83

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ

БЕНЗОИЛПРОПЭТИЛА И ЭТИЛОВОГО ЭФИРА N-3,4-ДИХЛОРФЕНИЛАЛАНИНА

В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

         COC H

        /   6 5

       N

       │\CH(CH )COOC H                                 М.м. 366,3.

       │      3     2 5

     // \

    │   ││_

     \\ /  Cl

       │

       Cl

Бензоилпропэтил (синоним - карахол) действующее начало - N-бензоил-N-(3,4-дихлорфенил) аланин-этиловый эфир - белое кристаллическое вещество с Т. плавления 65 - 67 °С; растворимость при 20 °С в % масс.: в этиловом спирте - 6, метиловом спирте - 16, толуоле - 15, хлороформе - 40, ацетоне - 26.

При производстве в воздухе рабочей зоны может находиться в виде паров и аэрозоли.

       NH-CH(CH )COOC H

       │       3     2 5

     // \

    │   ││_                                            М.м. 262,0.

     \\ /  Cl

       │

       Cl

Этиловый эфир N-3,4-дихлорфенилаланина - белое кристаллическое вещество с т. плавления 36 - 38 °С; при температуре выше 300 °С разлагается. Растворяется в спиртах, толуоле, м-ксилоле. Является полупродуктом в производстве бензоилпропэтила. В воздухе может находиться в виде паров и аэрозоли.

I. Характеристика метода

1. Определение основано на хроматографическом разделении бензоилпропэтила и этилового эфира N-3,4-дихлорфенилаланина в тонком слое силикагеля с последующим обнаружением зон локализации веществ с помощью раствора марганцовокислого калия и реактива Драгендорфа.

2. Отбор проб проводится с концентрированием (фильтр "синяя лента" и этиловый спирт).

3. Предел измерения в анализируемом объеме пробы - 5 мкг (для обоих веществ).

4. Предел измерения в воздухе - 1 мг/куб. м (при отборе 5 л воздуха).

5. Диапазон измеряемых концентраций - 1 - 8 мг/куб. м.

6. Определению не мешают все сопутствующие в производстве вещества.

7. Граница суммарной погрешности измерения для бензоилпропэтила - +/- 15%, для этилового эфира N-3,4-дихлорфенилаланина - +/- 10%.

8. Предельно допустимая концентрация в воздухе рабочей зоны: бензоилпропэтила - 5 мг/куб. м, этилового эфира N-3,4-дихлорфенилаланина - 4 - 5 мг/куб. м (ориентировочная, расчетная).

II. Реактивы, растворы, материалы

Бензоилпропэтил, 99,5-процентный

Этиловый эфир N-3,4-дихлорфенилаланина, 99,5-процентный

Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78

Ацетон, х.ч., ГОСТ 2603-79

Аммиак, ч.д.а., ГОСТ 3760-79, 25-процентный водный раствор

Эфир диэтиловый, х.ч., ГОСТ 6262-79

Спирт этиловый, ТУ 6-09-17-10-77, 96-процентный

Калий марганцовокислый, х.ч., ГОСТ 20490-75

Висмут азотнокислый основной, ч., ГОСТ 4110-75

Кислота серная, х.ч., ГОСТ 4204-77

Кислота уксусная ледяная, о.с.ч., ГОСТ 18270-72

Калий йодистый, х.ч., ГОСТ 4232-74

Кальций сернокислый, ГОСТ 3210-77, ч.д.а.

Силикагель марки КСК

Фильтры бумажные "синяя лента", ТУ 6-09-1678-77

Подвижная фаза: гексан - ацетон - водный аммиак (10:5:0,8)

Проявляющий реактив N 1: 0,5 г марганцовокислого калия растворяют в 47,5 мл воды и добавляют 2,5 мл серной кислоты. Реактив должен быть свежеприготовленным.

Проявляющий реактив N 2 (реактив Драгендорфа): к раствору 850 мг основного азотнокислого висмута в 40 мл воды и 10 мл уксусной кислоты прибавляют раствор 8 г калия йодистого в 20 мл воды. Этот раствор устойчив в течение 10 суток. Для проявления хроматограммы 1 мл этого раствора разбавляют 2 мл уксусной кислоты и 10 мл воды. Реактив должен быть свежеприготовленным.

Стандартные растворы бензоилпропэтила и этилового эфира N-3,4-дихлорфенилаланина концентрации 1000 мкг/мл готовят растворением соответствующих навесок (в пересчете на действующее начало) в 10 мл этилового спирта. Устойчивы в течение трех суток.

III. Приборы и посуда

Аспирационное устройство

Фильтродержатели

Поглотительные приборы Рихтера, ТУ 25-21-1081-75

Ротационный испаритель ИР-IМ, ТУ 25-11-944-74

Камера стеклянная хроматографическая, ГОСТ 10565-75

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74

Микропипетка или стеклянный капилляр

Микрошприц емкостью 10 мкл

Колбы грушевидные для отгонки растворителя, ГОСТ 10894-72

Стаканы химические емкостью 50 мл, ТУ 25-11-917-74

Колбы мерные, цилиндры, мензурки, ГОСТ 1770-74

Пипетки различной емкости, ГОСТ 20292-74

Пробирки с притертыми пробками емкостью 5 мл, ГОСТ 10515-75

Пластинки для хроматографии "Силуфол", 150 х 150 мм

Пластинки для хроматографии стеклянные, 90 х 120 мм.

Стеклянную пластинку, промытую содой, хромовой смесью и дистиллированной водой сушат и протирают этиловым спиртом. Компоненты сорбционной массы обрабатывают следующим образом. Сернокислый кальций сушат при температуре 150 °С в течение 6 ч и просеивают через сито 100 мкг. Хранят в банке с притертой пробкой. Силикагель размалывают на шаровой мельнице. Суспензию 250 г измельченного силикагеля в 2,5 л дистиллированной воды помещают в химический стакан (h = 20 см, d = 14 см). Тщательно перемешивают содержимое стакана и оставляют на 16 мин. После этого надосадочную жидкость переливают во второй стакан такого же размера и доливают воду до уровня 19 см. В этом стакане суспензию отстаивают 30 мин., надосадочную жидкость сливают в третий стакан и оставляют на 60 мин., затем переливают в четвертый стакан и отстаивают жидкость 120 мин. Надосадочную жидкость выливают, осадок высушивают при 130 - 140 °С в течение суток. Стеклянные пластинки покрывают сорбционной массой. Для приготовления сорбционной массы на 8 - 9 пластинок смешивают 14 г силикагеля, 2 г сернокислого кальция, 60 мл дистиллированной воды и перемешивают до образования однородной массы. 2 - 3 чайных ложки массы наливают по пластинку и, покачивая, распределяют равномерно на поверхности. Пластинки сушат 12 ч в сухом шкафу при 100 - 110 °С. Хранят пластинки в эксикаторе.

IV. Условия отбора проб воздуха

Воздух со скоростью 1 л/мин. аспирируют через последовательно соединенные фильтродержатель с бумажным фильтром и поглотительный прибор, содержащий 15 мл этилового спирта. Для определения 1/2 ПДК отбирают не более 5 л воздуха. Пробы можно хранить в течение трех суток.

V. Условия анализа

    Бумажный  фильтр  извлекают  из патрона (фильтродержателя) и помещают в

химический  стаканчик.  Промывают  бумажный фильтр тремя порциями этилового

спирта  по 5 мл, собирают смыв в отгонной колбе. Туда же сливают содержимое

поглотительного  прибора.  Этиловый спирт отгоняют (ротационный испаритель,

ток  воздуха)  досуха. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл диэтилового эфира,

тщательно  обмывая  стенки  колбы.  На  стартовую  линию хроматографической

пластинки  количественно наносят пробу, слева и справа от нее наносят смеси

стандартных     растворов     бензоилпропэтила     и     этилового    эфира

N-3,4-дихлорфенилаланина, содержащие по 5; 10; 20; 40 мкг каждого вещества.

Размер  пятна  должен  быть  не  более 1 см. Пластинку помещают в наклонном

положении   в   хроматографическую   камеру,   в  которую  за  30  мин.  до

хроматографирования был налит подвижный растворитель - гексан:ацетон:водный

аммиак  (10:5:0,8) в таком количестве, чтобы пластинка погружалась не более

чем  на  0,5  см.  Когда фронт растворителя поднимается на 10 см, пластинку

вынимают  из  камеры  и  подсушивают  на  воздухе  в  вытяжном шкафу. Затем

пластинку  опрыскивают  проявляющим  реактивом  N  1, при этом обнаруживают

желтые   пятна  этилового  эфира  N-3,4-дихлорфенилаланина  (R   0,7).  Для

                                                              f

количественного определения измеряют площадь пятна пробы и соответствующего

ему  по  размеру  и  интенсивности  окраски  пятна стандартной шкалы. Затем

пластинку  опрыскивают  проявляющим  реактивом  N  2.  При этом проявляются

коричневые  пятна  бензоилпропэтила  (R   0,6).  Окраска  пятен устойчива в

                                       f

течение  нескольких  минут.  Для количественного определения также измеряют

площадь   соответствующего   по   размеру  и  интенсивности  окраски  пятна

стандартной шкалы.

Концентрацию бензоилпропэтила или N-3,4-дихлорфенилаланина этилового эфира в воздухе (Х) в мг/куб. м вычисляют по формуле:

                                   G   х S

                                    ст    пр

                               Х = ---------,

                                   S   х V

                                    ст    20

    где:

    G - количество вещества в пятне стандарта, мкг;

    S   - площадь пятна пробы, кв. мм;

     пр

    S   - площадь пятна стандарта, кв. мм;

     ст

    V   - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным

     20

условиям, л.

VI. Требования безопасности

Соблюдать все необходимые требования техники безопасности при работе в химических лабораториях.

VII. Разработчики

Всесоюзный научно-исследовательский технологический институт гербицидов и регуляторов роста растений (ВНИТИГ), г. Уфа.