Утверждены

Минздравом СССР

12 мая 1983 г. N 2807-83

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДЕФОЛИАНТА ДРОППА В ВОЛОКНАХ, ЛИСТЬЯХ

И ПОЧВЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

--------------------------------

<*> Разработаны Ш. Сирожиддиновым, С. Мусамухамедовым (ТашМИ).

    Краткая  характеристика   пестицида.   Дропп - N-(1,2,3-тиадиазолил-5)-

N'-фенилмочевина.  Брутто-формула  C H ON S.   Молекулярная   масса  212,1.

                                    9 8  4

Общепринятое название - тидиазурон. ДСД 0,006 мг/кг. Содержание  в  семенах

хлопчатника,  хлопковом  масле  не  допускается.   Препарат - светло-желтый

порошок  со  слабым  специфическим запахом. Т. пл. 213  °C. Растворимость в

воде  до  20,  ацетоне - 8000,  метаноле - 4500 мг/л  при  20 °C.  Препарат

применяется в качестве дефолианта в хлопководстве.

Принцип метода. Метод основан на извлечении дроппа из исследуемой пробы органическим растворителем и хроматографировании в тонком слое силикагеля с последующей термической обработкой. Препарат проявляется в виде светло-коричневых пятен на белом фоне. Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 125.

Таблица 125

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА

┌─────────────────────────────────────┬───────────────────────────────────┐

│             Параметры               │        Анализируемая проба        │

│                                     ├────────┬────────┬────────┬────────┤

│                                     │ почва  │ листья │волокна │ семена │

├─────────────────────────────────────┼────────┼────────┼────────┼────────┤

│Предел определения, мг/кг            │0,025   │0,05    │0,1     │0,05    │

│Число параллельных определений       │8       │10      │9       │8       │

│Среднее значение определения, %      │87      │88,7    │90,2    │87,3    │

│Стандартное отклонение, %            │+/- 6,82│+/- 8,93│+/- 3,86│+/- 5,66│

│Доверительный интервал среднего, %   │+/- 8,13│+/- 9,87│+/- 4,12│+/- 6,08│

└─────────────────────────────────────┴────────┴────────┴────────┴────────┘

Избирательность метода. Метод избирателен для дроппа, присутствие пестицидов, близких по химическому строению, определению не мешает.

Реактивы и растворы. Дропп х.ч. Ацетон ч. Гексан х.ч. Хлороформ ч. Концентрированная серная кислота х.ч. Едкий натр х.ч. Сульфат натрия безводный ч.д.а. Оксид алюминия дли хроматографии II степени активности. Едкий натр, 50-процентный раствор. Стандартный раствор А (навеску 10 мг химически чистого дроппа растворяют в мерной колбе в 100 мл ацетона; в 1 мл данного раствора содержится 0,1 мг препарата). Стандартный раствор Б (раствор А разводят ацетоном в 100 раз).

Приборы и посуда. Хроматографическая камера. Ротационный вакуумный испаритель. Сушильный шкаф. Аппарат для встряхивания. Колонки для адсорбционной хроматографии (300 x 15 мм). Фильтры бумажные. Бумага универсальная индикаторная. Денситометр "БИАН-170". Пластинки "Силуфол" размером 150 x 150 мм. Колбы: конические на 50 и 250 мл; мерные на 50 и 100 мл. Пипетки на 0,1; 1 и 10 мл. Микрошприцы на 10 и 100 мкл. Пробирки центрифужные на 10 мл. Делительная воронка на 250 мл. Стаканы химические.

Приготовление хроматографической колонки. В хромагографическую колонку помещают ватный тампон, последовательно 3 г сульфата натрия, 5 г оксида алюминия, сверху снова 3 г безводного сульфата натрия.

Ход анализа. Экстракция. Пробу измельченных листьев хлопчатника (20 г) помещают в коническую колбу на 250 мл и заливают 7,5 мл концентрированной серной кислоты. Осторожно взбалтывают в течение 10 - 15 мин. и оставляют на 10 - 12 ч. После выдержки в колбу по стенке наливают 50 мл дистиллированной воды, затем при помощи 50-процентного раствора едкого натра доводят pH до 8 (по индикаторной бумаге). Все содержимое колбы переносят в делительную воронку и препарат трижды экстрагируют гексаном по 15 мин. путем встряхивания порциями по 30 мл. Экстракты объединяют, сушат над безводным сернокислым натрием (5 - 7 г) и фильтруют через бумажный фильтр. Затем экстракт упаривают на водяной бане до объема 2 - 3 мл.

Пробу хлопкового волокна (10 г) заливают 50 мл ацетона на 2 ч. Встряхивают в течение 10 мин. Фильтруют и еще 2 раза экстрагируют препарат ацетоном по 20 мл. Фильтраты объединяют в колбу и упаривают растворитель до объема 2 - 3 мл.

Пробу почвы (40 г) 20-процентной влажности заливают на 10 - 12 ч 50 мл хлороформа. Далее встряхивают в течение 30 мин. и отфильтровывают растворитель. Экстракцию повторяют трижды. Объединенные экстракты сушат безводным сернокислым натрием (5 - 7 г). Растворитель упаривают до объема 2 - 3 мл.

Примечание. Если экстракты недостаточно чистые, то проводят дополнительную очистку экстракта путем пропускания его через хроматографическую колонку. Сначала колонку дважды промывают по 25 мл хлороформа, элюат отбрасывают. После этого экстракт вносят и колонку и препарат элюируют 50 мл гексана. Элюат собирают в колбу, упаривают до объема 2 - 3 мл.

    Хроматографирование.  Все экстракты исследуемой пробы (листья, волокна,

почва)  объемом  2  -  3  мл  количественно переносят в конические пробирки

растворителем-экстрагентом. Растворитель упаривают до объема 0,1 - 0,2 мл и

оставшиеся  экстракты  количественно  переносят  на пластинку. Параллельно,

рядом  с пробами, микрошприцем или пипеткой наносят стандартный раствор Б с

содержанием   препарата   1;   3;   5   и  10  мкг.  Пластинку  помещают  в

хроматографическую  камеру,  в  которую заранее,  за  30 мин., налита смесь

растворителей гексан-ацетон (3:2). После  поднятия  фронта растворителей на

10  -  12  см  пластинку  вынимают из камеры и высушивают на воздухе. Затем

пластинку  помещают  в  сушильный  шкаф,  нагретый  до  200  +/-  5 °C,  на

5 - 7 мин. Препарат проявляется в виде  светло-коричневых  пятен.  Величина

R  0,33 +/- 0,02 на белом фоне.

 f

Обработка результатов анализа. Количественно дропп в анализируемой пробе определяют путем денситометрирования пятен проб и стандартов на денситометре "БИАН-170" или же путем визуального сравнения интенсивности окрашивания и площадей пятен проб и стандартов. При денситометрировании содержание препарата (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

                                      A

                                  X = -,

                                      P

где:

A - количество препарата, найденное путем денситометрирования, мкг;

P - масса пробы, г.

При визуальной оценке концентрацию дроппа (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

                                     AV

                                 X = ---,

                                     V P

                                      1

    где:

    A  -  количество  вещества, найденное в анализируемом объеме экстракта,

мкг;

    V - объем экстракта, взятый для анализа, мл;

    V  - объем экстракта всей пробы, мл;

     1

    P - масса пробы почвы, листьев, волокон и семян, г.

Требования безопасности. Соблюдаются общие правила по технике безопасности, необходимые при работе с пестицидами и химическими реактивами.