Утверждены

Минздравом СССР

12 мая 1983 г. N 2790-83

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДАКОНИЛА В РАСТИТЕЛЬНОЙ ПРОДУКЦИИ,

ПОЧВЕ И ВОДЕ МЕТОДАМИ ТОНКОСЛОЙНОЙ И ГАЗОЖИДКОСТНОЙ

ХРОМАТОГРАФИИ <*>

--------------------------------

<*> Разработаны А.А. Красных, М.Ф. Зелениной, В.Ф. Логачевым, Л.А. Меланьиной (ВНИИЗР).

    Краткая    характеристика    препарата.    Даконил   -   2,4,5,6-тетра-

хлоризофталодинитрил. Брутто формула  C Cl N .  Молекулярная  масса  265,9.

                                       8  4 2

Общепринятое  название - хлороталонил.  Химически чистое вещество  даконила

представляет собой белый кристаллический порошок без запаха  с т. пл. 250 -

251 °C.  Растворимость в воде  0,6 мг/л. Умеренно растворим  в  большинстве

органических растворителей. ДСД 0,003 мг/кг (временно).

Принцип метода. Метод основан на извлечении даконила из исследуемой пробы органическим растворителем (гексаном, петролейным эфиром), очистке экстракта на хроматографической колонке или путем вымораживания восков с последующим определением тонкослойной или газожидкостной хроматографией с ДЭЗ.

Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 65.

Таблица 65

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДАКОНИЛА

┌──────────────────────────────────────────────────────┬─────────┬────────┐

│                       Параметры                      │   ТСХ   │  ГЖХ   │

├──────────────────────────────────────────────────────┼─────────┼────────┤

│Минимальное детектируемое количество препарата        │1 - 3 мкг│1 нг    │

│Нижний предел определения, мг/л, мг/кг:               │         │        │

│  в воде                                              │0,01     │0,0005  │

│  в почве                                             │0,02     │0,001   │

│  в растениях                                         │0,08     │0,004   │

│Среднее значение определения, %:                      │         │        │

│  в растениях                                         │78,6     │93,0    │

│  в почве                                             │87,5     │97,0    │

│  в воде                                              │89,0     │89,0    │

│Стандартные отклонения, %:                            │         │        │

│  в растениях                                         │+/- 9,0  │+/- 5,0 │

│  в почве                                             │+/- 8,7  │+/- 3,3 │

│  в воде                                              │+/- 7,9  │+/- 7,9 │

│Доверительный интервал среднего (p = 0,95 и n = 5), %:│         │        │

│  в растениях                                         │+/- 6,8  │+/- 4,0 │

│  в почве                                             │+/- 8,7  │+/- 5,0 │

│  в воде                                              │+/- 7,9  │+/- 7,9 │

└──────────────────────────────────────────────────────┴─────────┴────────┘

Избирательность метода. Метод специфичен, другие пестициды в данных условиях хроматографирования определению не мешают.

    Реактивы  и  растворы.  н-Гексан  х.ч.  Ацетон  ч.д.а.  Хлороформ  х.ч.

Петролейный  эфир  х.ч.  Сульфат  натрия безводный ч.д.а. Оксид алюминия II

степени    активности.    Дифениламин    ч.д.а.    Нитрат    серебра   х.ч.

Гексациано(II)феррат  калия  х.ч.  Сульфат  цинка  х.ч. Пластинки "Силуфол"

УФ   .  Азот  особой  чистоты. Кислота ортофосфорная ч. Хлорид аммония х.ч.

  254

Водород.  5%  XE-60  на  хроматоне  N-AW  (0,16  -  0,20  мм). Даконил х.ч.

Стандартные  растворы  даконила  с  содержанием  1  и  100 мкг/мл в ацетоне

(хранят в холодильнике 25 - 30 дней).

Раствор для осаждения. Хлорид аммония (5 г) растворяют в 100 мл дистиллированной воды, смешивают с 10 мл 85-процентной ортофосфорной кислоты и доводят объем раствора до 1 л дистиллированной водой.

Проявляющие реагенты. Нитрат серебра (0,5 г) растворяют в 5 мл дистиллированной воды, добавляют 7 мл раствора аммиака и доводят объем ацетоном до 100 мл. Раствор хранят в холодильнике 7 - 10 дней.

Раствор дифениламина в этаноле (20-процентный) хранят 30 дней.

Приборы и посуда. Аппарат для встряхивания. Испаритель ротационный. Воронки делительные. Колонка для адсорбционной хроматографии длиной 30 см с диаметром 15 мм. Воронки химические. Хроматографическая камера. Камера для опрыскивания. Пульверизатор стеклянный. Колбы: конические нормального шлифа; остродонные; мерные на 100 мл. Микропипетки на 0,1 мл. Прибор для облучения УФ-светом. Газовый хроматограф "Цвет-106" с ДЭЗ или аналогичный. Микрошприц на 10 мкл. Колонка хроматографическая стеклянная длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм. Баллоны газовые. Секундомер. Холодильник "ЗИЛ" или другой марки.

Ход анализа. Экстракция. Анализируемую пробу воды (200 мл) помещают в делительную воронку и трижды экстрагируют н-гексаном или петролейным эфиром порциями по 50 мл в течение 5 мин. Объединенный экстракт сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют на ротационном испарителе до объема 0,2 - 0,3 мл при температуре 40 °C, остаток удаляют в токе воздуха.

Пробу измельченной почвы (100 г) заливают 80 мл н-гексана или петролейного эфира и встряхивают в течение 1 ч. Фильтруют через слой безводного сульфата натрия (15 - 20 г) и отгоняют на испарителе до объема 0,2 - 0,3 мл. Остаток удаляют в токе воздуха.

Пробу мелкоизмельченного растительного материала (трава, огурцы, томаты, клубни картофеля) помещают в колбу на 250 мл, добавляют 50 мл гексана или петролейного эфира и экстрагируют даконил в течение 1 ч. Для предотвращения образования эмульсии в колбу с измельченными клубнями прибавляют 10 - 15 г безводного сульфата натрия. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр с безводным сульфатом натрия, трижды ополаскивая колбу тем же растворителем порциями по 10 мл. Объединенный экстракт выпаривают на ротационном испарителе.

Навеску капусты (25 г) заливают 40 мл н-гексана или петролейного эфира. Экстракцию проводят путем встряхивания в течение 15 мин., растворитель отфильтровывают через бумажный фильтр со слоем безводного сульфата натрия. Экстракцию проводят трижды. Объединенный экстракт концентрируют на ротационном испарителе до объема 0,2 - 0,3 мл. Остаток удаляют в токе воздуха.

Очистка экстракта. Сухой остаток из почвы, ботвы картофеля растворяют в 10 мл ацетона, приливают 40 мл воды и по 1 мл 15-процентного раствора гексациано(II)феррата калия и 30-процентного раствора сульфата цинка. Через 10 мин. раствор фильтруют в делительную воронку через плотный бумажный фильтр. Из водно-ацетонового раствора даконил экстрагируют тремя порциями н-гексана по 30 мл в течение 3 мин. Экстракт объединяют, сушат безводным сульфатом натрия и отгоняют на ротационном испарителе до 0,2 - 0,3 мл. Остаток удаляют в токе воздуха.

Сухой экстракт из клубней растворяют в 10 мл н-гексана и переносят в хроматографическую колонку, заполненную оксидом алюминия на высоту 3 см (15 г); через колонку пропускают 30 мл гексана, который отбрасывают. Препарат элюируют 60 мл хлороформа. Элюат упаривают досуха на ротационном испарителе. Остаток из капусты растворяют в 5 мл охлажденного ацетона, добавляют 5 мл дистиллированной воды и 30 мл охлажденного осаждающего раствора. Колбу ставят на 1 ч в холодильник. После этого ее содержимое отфильтровывают через плотный бумажный фильтр. Далее экстракт клубней очищают так же, как экстракт из ботвы.

    Условия  определения  методом  ГЖХ.  Используют  колонку  длиной  1 м с

внутренним  диаметром  3  мм.  Носитель  - хроматон N-AW (0,20 - 0,22 мм) с

неподвижной  фазой  5%  XE-60. Температура (°C): колонки - 210, детектора -

180,  испарителя  -  220.   Расход   газа-носителя   42 мл/мин.,  воздуха -

                                         -12

300 мл/мин.  Шкала  электрометра  20 x 10    A.   Скорость  протяжки  ленты

самописца  200 мм/ч.  Время  удерживания  даконила  в  указанных   условиях

хроматографирования 4 мин. 12 с.

Сухой остаток растворяют в точно известном количестве ацетона (5 - 10 мл), в испаритель вводят 2 - 4 мкл рабочего раствора.

    Условия   определения   методом   ТСХ.   Сухой   остаток  растворяют  в

0,2 - 0,3 мл н-гексана и с помощью микропипетки наносят на пластинку. Колбу

тщательно  ополаскивают несколькими каплями растворителя, который наносят в

центр  пятна,  рядом  с  пробой  наносят стандартные растворы,  после этого

пластинку  помещают в хроматографическую  камеру  с  системой растворителей

гексан-ацетон  (5:1),  взятых  в  количестве  20 мл.  После  подъема фронта

подвижных растворителей на 10 см ее вынимают из камеры,  сушат на воздухе и

помещают на 15 мин. под источник УФ-света. После  этого  обрабатывают одним

из проявляющих реагентов (5 - 8 мл)  и вновь подвергают облучению.  Даконил

проявляется  в  виде  черных  или  голубоватых пятен на светло-сером фоне с

величиной R  0,52 +/- 0,05 в указанной системе подвижных растворителей.

           f

    Обработка  результатов  анализа.  Содержание препарата (X, мг/кг, мг/л)

при определении методом ГЖХ рассчитывают по формуле:

                                   C  V H

                                    ст 2 1

                               X = -------,

                                    H V P

                                     2 1

    где:

    C   - содержание даконила в стандартном растворе, нг;

     ст

    H   и  H   -  высоты  пиков  соответственно исследуемого и стандартного

     1      2

растворов, мм;

    V  - объем экстракта, введенный в хроматограф, мкл;

     1

    V  - объем конечного экстракта, в котором растворен сухой остаток, мл;

     2

    P - навеска или объем анализируемой пробы, г, мл.

    Содержание  даконила  при  определении   методом  ТСХ  рассчитывают  по

формуле:

                                     AS

                                       2

                                 X = ---,

                                     PS

                                       1

    где:

    A - содержание препарата в стандартном растворе, мкг;

    S   и  S  - площади пятен соответственно стандартного раствора и пробы,

     1      2

кв. мм;

    P - масса или объем анализируемой пробы, г или мл.

Требования безопасности. Следует соблюдать все правила безопасности, обычно рекомендуемые для работы с органическими растворителями и УФ-светом.