Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

12 мая 1983 г. N 2789-83

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ОПРЕДЕЛЕНИЮ БУТОКАРБОКСИМА

В ПОЧВЕ, ВОДЕ И РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

1. Краткая характеристика препарата

     CH

       3\

         CHCCH

        /  ││ 3

    CH S   NOCONHCH

      3            3                                           М.м. 197,27.

    Бутокарбоксим, дравин - 755 (0-(N-Метилкарбамоил)-2-метилтио-бутанон-3-

окоим).

    Коричневая   вязкая   жидкость  с  неприятным   запахом,   при   низкой

температуре - кристаллы. Т. пл. 32 - 37 °С,  хорошо растворим в большинстве

органических   растворителей,   растворимость  в   воде 1 - 2%.  По  данным

УэНИИСГиПз  препарат  относится  к  III классу  опасности - ЛД    для  крыс

                                                              50

310 мг/кг. ПДК в воде 0,1 мг/л.

Бутокарбоксим - инсектицид и акарицид системного действия, применяется против растительноядных клещей, тлей, трипсов и кокацид в дозировках 1 - 1,5 и 2,5 кг/га на посевах хлопчатника.

2. Методика определения бутокарбоксима в почве,

воде и растительном материале

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Методика основана на хроматографии бутокарбоксима в тонком слое силикагеля в системе гексан - бензол - ацетон или хлороформ - гексан - ацетон после экстракции его хлороформом и обнаружении зон локализации препарата:

а) раствором марганцовокислого калия с последующим нагреванием пластинки;

б) парами йода;

в) при облучении пластинки ультрафиолетовым светом с длиной волны 245 нм.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Предел обнаружения в мкг - 1 мкг.

Предел обнаружения:

в воде - 0,005 мг/л,

в почве - 0,02 мг/кг,

в растительном материале - 0,04 мг/кг.

Среднее значение определения:

в воде - 91%,

в почве - 86,3%,

в растительном материале - 87,2%.

Доверительный интервал среднего при Р = 0,95 и П = 5:

в воде +/- 4,7%,

в почве +/- 8,8%,

в растительном материале +/- 9,1%.

2.1.3. Избирательность метода ГХЦГ, ДДТ, толуин, базудин, антио и фосфамид определению не мешают.

2.2. Реактивы и материалы

Бутокарбоксим, х.ч., стандартный раствор, содержащий 100 мкг/мл хлороформа; 0,01 г бутокарбоксима доводят до метки хлороформом в мерной колбе на 100 мл, раствор устойчив 1 месяц при условии хранения в холодильнике.

Хлороформ, х.ч., ГОСТ 215-74.

Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-73.

Ацетон, х.ч., ГОСТ 2603-71.

Бензол, х.ч., ГОСТ 5955-75.

Калий марганцовокислый, ч.д.а., ГОСТ 490-75, 0,3-процентный водный раствор.

Йод кристаллический, ч.д.а., ГОСТ 4159-64.

Натрий сернокислый безводный, ч.д.а., ГОСТ 4166-76.

2.3. Приборы, аппаратура, посуда

Камера для хроматографирования, ГОСТ 10565-63.

Камера с парами йода (10 - 20 г кристаллического йода смачиваются водой и помещаются на дно герметически закрытой камеры).

Аппарат для встряхивания, ТУ 6421-1081-73.

Хроматографические пластинки "Силуфол - ИV-254" (Хемапол, ЧССР).

Ротационный испаритель ИР-1, ТУ 25-11-917-74.

Микрошприцы или микропипетки, ГОСТ 20292-74.

Делительные воронки, ГОСТ 8613-75.

Посуда лабораторная, ГОСТ 1770-74.

Пульверизаторы стеклянные для обработки пластинок.

Фильтры для тонких осадков.

2.4. Отбор проб

Отбор проб должен проводиться в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов".

2.5. Подготовка к определению

Вода. Воду фильтруют от механических примесей и отбирают среднюю пробу 200 мл.

Почва. Средняя проба растирается в ступке и просеивается через сито 0,5 - 1 мм. Из просеянной пробы берется на анализ 50 гр.

Растительный материал. Листья, стебли хлопчатника измельчают ножницами и отбирают для анализа 25 гр.

Хроматографические пластинки активируют в течение двух часов при 120 - 130 °С в сушильном шкафу, хранят в эксикаторе.

Систему подвижных растворителей готовят за 20 минут до хроматографии:

а) гексан - бензол - ацетон, в соотношении 10:1:3;

б) хлороформ - гексан - ацетон в соотношении 5:4:1.

2.6. Проведение определения

2.6.1. Почва. 50 г воздушно-сухой почвы, измельченной, просеянной через сито с диаметром отверстий 0,5 мм, помещают в коническую колбу, увлажняют 10 мл воды, заливают 50 мл хлороформа, встряхивают на аппарате для встряхивания в течение 15 минут и фильтруют после отстаивания через плотный фильтр со слоем б/в сернокислого натрия (8 - 10 гр.), операцию повторяют дважды, обрабатывая почву по 50 мл хлороформа, экстракты объединяют и упаривают на водяной бане при 60 °С или концентрируют с помощью вакуумного испарителя при 30 °С до объема 0,2 мл.

2.6.2. Вода. 200 мл воды помещают в делительную воронку, трижды экстрагируют 50, 20, 10 мл хлороформа в течение 10 минут. Экстракты объединяют, сушат 8 - 10 г б/в сернокислого натрия в течение 10 минут и фильтруют через плотный бумажный фильтр, промывают фильтр 10 мл хлороформа и упаривают до объема 0,2 мл как описано выше.

2.6.3. Растительный материал. Измельченную пробу помещают в коническую колбу, заливают 50 мл хлороформа, встряхивают на аппарате для встряхивания в течение 10 мин. и фильтруют через плотный фильтр со слоем б/в сернокислого натрия (8 - 10 г), операцию повторяют еще дважды, обрабатывая пробу 50 мл хлороформа. Экстракты объединяют и упаривают на водяной бане при 60 °С или концентрируют с помощью вакуумного испарителя при 30 °С до объема 0,2 - 0,3 мл.

2.7. Хроматографирование

На силуфоловую пластинку экстракт количественно наносят при помощи капиллярной пипетки так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 1,5 см от нижнего края пластинки. Колбочку с экстрактом 2 - 3 раза смывают небольшими (0,1 - 0,2 мл) порциями хлороформа и наносят в центр первого пятна. Справа и слева от пробы на расстоянии 2 см наносят стандартные растворы бутокарбоксима, содержащие 5, 10 или 20 мкг препарата.

Пластинку помещают в хроматографическую камеру, в которую за 20 - 30 минут до хроматографирования залита смесь растворителей: гексан - бензол - ацетон (10:1:3) или хлороформ - гексан - ацетон (5:4:1). Смесь заливается в количестве, обесцвечивающем погружение пластинки на 0,5 см. После того как фронт растворителя поднимется на 10 см, пластинку вынимают и оставляют на 10 - 15 мин. на воздухе для испарения подвижного растворителя.

Затем пластинку обрабатывают одним из проявляющих реактивов:

    а) 0,3-процентным   водным   раствором   марганцовокислого   калия    с

последующим  нагревом  пластинки  над электрической плиткой в течение 1 - 2

минут;  на  розовом  фоне  проявляется  желтое   пятно   бутокарбоксима   с

R  = 0,3 +/- 0,05;

 f

б) пластинку выдерживают несколько минут в камере с парами йода. Препарат проявляется в виде коричневых пятен на светлом фоне;

в) в УФ-свете при 254 нм бутокарбоксим проявляется на пластинке в виде серых флуоресцирующих пятен на зеленом фоне.

2.8. Обработка результатов анализа

Количественное определение бутокарбоксима проводят путем сравнения интенсивности окраски и измерения площади пятна пробы и того стандарта, площадь которого наиболее близка по величине и интенсивности к пятну пробы.

Концентрацию бутокарбоксима X в (мг/кг) или (мг/л) вычисляют по формуле:

                                       A

                                   X = -,

                                       P

где:

A - количество бутокарбоксима, найденное в анализируемой пробе, мкг;

P - навеска анализируемой пробы: почвы и растительного материала в (г), воды в (мл).

3. Требования безопасности

Соблюдаются общие правила по технике безопасности, необходимые при работе с химикатами, летучими органическими соединениями и пестицидами.

4. Разработчики

Узбекский НИИ санитарии, гигиены и профзаболеваний, г. Ташкент.