"Методические указания по определению фурадана в растениях, почве и воде методом тонкослойной хроматографии" // Технорма.RU

Утверждены

Минздравом СССР

30 марта 1981 г. N 2369-81

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ФУРАДАНА В РАСТЕНИЯХ, ПОЧВЕ И ВОДЕ

МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

--------------------------------

<*> Разработаны Л.И. Бублик, Н.В. Федоренко (УкрНИИЗР).

Краткая характеристика препарата. Фурадан - O-(2,3-дигидро-2,2-диметил-

7-бензофуранил)-N-метилкарбамат. Брутто-формула C H O N. Молекулярная

12 15 3

масса 221,26. Общепринятое название - карбофуран. Кристаллическое вещество,

т. пл. 153 - 154 °C, т. пл. технического препарата 150 - 152 °C. Давление

паров 0,0027 Па при 33 °C и 0,015 Па при 50 °C. Растворимость при 25 °C,

г/100 мл: в воде - 0,7, ацетоне - 15, хлористом метилене - 12, этаноле -

4, петролейном эфире - 1. В кислотах и щелочах разлагается при кипячении, в

спиртовых растворах щелочей - при комнатной температуре. Для крыс ЛД

через рот 8 - 14 мг/кг.

Продукты метаболизма фурадана - O-(2,3-дигидро-2,2-диметил-3-гидрокси-

7-бензофуранил)-N-метилкарбамат (II), ЛД 18 мг/кг; 2,3-дигидро-2,2-

диметил-3-кето-7-бензофуранил-N-метилкарбамат (III), ЛД 69 мг/кг;

2,3-дигидро-2,2-диметил-7-бензофуранол (IV), ЛД 2200 мг/кг;

2,3-дигидро-2,2-диметил-3,7-бензофурандиол (V), ЛД 1350 мг/кг;

2,3-дигидро-2,2-диметил-3-оксо-7-бензофуранол (VI), ЛД 295 мг/кг.

Фурадан - акарицид, нематоцид, системный инсектицид. ДСД 0,01 мг/кг. Остаточные количества фурадана в сахарной свекле не допускаются.

Принцип метода. Метод основан на извлечении фурадана и его метаболитов из исследуемой пробы хлороформом или подкисленной водой, очистке путем перераспределения в двух несмешивающихся растворителях и определении методом ТСХ. Проявление основано на гидролизе препаратов спиртовым раствором щелочи и образовании окрашенных соединений с солями диазония.

Метрологическая характеристика метода. Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 96.

Таблица 96

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА

┌────────────────┬────────────┬─────────┬───────────────┬─────────────────┐

│ Анализируемая │ Предел │Срднее │ Стандартное │ Доверительный │

│ проба │обнаружения,│значение │ отклонение, │ интервал при │

│ │ мг/кг │опреде- │ % │p = 0,95, n = 5, │

│ │ или мг/л │ления │ │ % │

│ ├──────┬─────┼────┬────┼───────┬───────┼────────┬────────┤

│ │ а │ б │ а │ б │ а │ б │ а │ б │

├────────────────┼──────┼─────┼────┼────┼───────┼───────┼────────┼────────┤

│Вода │0,002 │0,02 │82,5│80,9│+/- 9,3│+/- 6,5│+/- 14,8│+/- 10,3│

│Почва (чернозем)│0,010 │0,10 │85,6│82,4│+/- 3,8│+/- 4,9│+/- 6,0 │+/- 7,8 │

│Озимая пшеница │0,050 │0,30 │92,0│91,5│+/- 3,7│+/- 3,4│+/- 5,8 │+/- 4,1 │

│(зеленая масса) │ │ │ │ │ │ │ │ │

│Яблоки │0,040 │0,08 │83,5│84,9│+/- 4,7│+/- 5,8│+/- 7,5 │+/- 9,2 │

│Картофель │0,050 │0,10 │79,0│79,5│+/- 2,8│+/- 4,1│+/- 4,5 │+/- 6,5 │

│(клубни) │ │ │ │ │ │ │ │ │

│Сахарная свекла │0,050 │0,10 │81,8│82,5│+/- 4,9│+/- 5,2│+/- 7,6 │+/- 8,3 │

│(корнеплоды) │ │ │ │ │ │ │ │ │

└────────────────┴──────┴─────┴────┴────┴───────┴───────┴────────┴────────┘

Примечание. а - на пластинке "Силуфол"; б - на пластинке КСК.

Избирательность метода. Метод специфичен. Севин и другие пестициды не мешают определению.

Реактивы и растворы. Ацетон х.ч. н-Гексан ч. Этиловый спирт ректиф., 96-процентный. Хлороформ х.ч. Хлороводородная кислота, 0,25 н и 0,1 н растворы. Вода дистиллированная. Сульфат натрия безводный ч.д.а. Едкое кали х.ч. п-Нитроанилин ч.д.а. Нитрит натрия х.ч. Соли диазония: прочный синий Б, прочный красный Б, прочный голубой Б (бис-диазотированный о-дианизидин). Фурадан и его метаболиты (II, III, IV, V, VI) - 99%. Силикагель КСК N 2,5. Гипс медицинский. Пластинки "Силуфол" размером 15 x 15 см. Бумага фильтровальная.

Приготовление стандартных растворов: 0,025 г фурадана растворяют в 25 мл ацетона; 10 мл полученного раствора переносят в мерную колбу на 100 мл и ацетоном доводят до метки. Аналогично готовят стандартные растворы метаболитов, содержащих 100 мкг в 1 мл. Хранят растворы в темных склянках с притертыми пробками в холодильнике.

Проявляющие реагенты: 15-процентный KOH в спиртово-водном растворе

(15 г KOH растворяют в 60 мл этанола и 40 мл воды); 0,01-процентный раствор

соли диазония в ацетоне (0,01 г соли диазония растворяют в 100 мл ацетона).

Хранят в темной склянке 3 сут.; 0,1-процентный раствор паранитроанилина в

0,1 н хлороводородной кислоте (0,1 г паранитроанилина растворяют в 100 мл

0,1 н раствора хлороводородной кислоты); 4-процентный водный раствор

нитрита натрия (4 г NaNO растворяют в 100 мл дистиллированной воды).

Приборы и посуда. Весы аналитические и технические. Аппарат для встряхивания. Вакуумный насос. Хроматоскоп. Электроплитка. Водяная баня. Колбы мерные на 100 мл; плоскодонные на 250 мл; круглодонные на 250 мл. Мерные цилиндры на 50 и 100 мл. Микропипетки на 0,1 мл. Воронки делительные на 100 и 500 мл. Эксикатор. Камера для хроматографирования. Пульверизаторы стеклянные. Пластинки "Силуфол".

Ход анализа. Экстракция. Пробу воды (200 мл) помещают в делительную воронку. Экстрагируют фурадан и его метаболиты дважды хлороформом порциями по 50 мл, встряхивают каждый раз по 5 мин. Хлороформный экстракт сливают через фильтр с 15 г безводного сульфата натрия в отгоночную колбу. Отгоняют хлороформ на водяной бане при температуре воды в ней 80 °C до объема 0,1 - 0,2 мл.

Навеску 50 г воздушно-сухой почвы растирают в фарфоровой ступке, переносят в коническую колбу и заливают 200 мл дистиллированной воды, подкисленной до pH 3. Встряхивают 20 мин. Экстракт отфильтровывают через бумажный фильтр в делительную воронку. Затем проводят реэкстракцию хлороформом. Далее поступают так, как описано выше.

Пробу образца озимой пшеницы (20 г) измельчают, помещают в коническую колбу и заливают 400 мл дистиллированной воды, подкисленной хлороводородной кислотой до pH 3. Встряхивают 20 мин. Затем экстракт отфильтровывают в делительную воронку. Проводят реэкстракцию фурадана и его метаболитов дважды хлороформом по 100 мл, как описано выше. Экстрагируемые примеси не мешают определению.

Пробу измельченного образца (50 г) яблок, картофеля (клубни), сахарной свеклы (корнеплоды) переносят в коническую колбу и заливают 100 мл хлороформа, экстрагируют при встряхивании 20 мин. Полученный экстракт переносят в колбу через воронку с бумажным фильтром и 15 г безводного сульфата натрия. Отгоняют хлороформ на водяной бане или на ротационном испарителе и остаток сушат досуха (оставляют колбу открытой при комнатной температуре). Сухой остаток растворяют в 100 мл дистиллированной воды, переносят в делительную воронку и проводят реэкстракцию 2 раза по 30 мл хлороформа. Дальнейшие операции проводят, как описано выше.

Хроматографирование. После отгонки хлороформный остаток (0,1 - 0,2 мл) капилляром наносят в центр пластинки с тонким слоем адсорбента на расстоянии 1,5 см от нижнего края. Слева и справа микрошприцем или микропипеткой наносят стандартные растворы фурадана и его метаболитов с содержанием 0,5 - 30 мкг. Одинаковые объемы (0,005 - 0,05 мл) фурадана и его метаболитов наносят в одну точку. Затем пластинку помещают в хроматографическую камеру с подвижной фазой, которой служит смесь н-гексан-ацетон (3:2). Когда растворитель поднимется на высоту 10 см, пластинку вынимают и сушат на воздухе.

Проявление пластинок. Пластинки опрыскивают проявляющим реагентом N 1,

подсушивают и затем опрыскивают проявляющим реагентом N 2 или смесью

проявляющих реагентов N 3 и N 4 в соотношении 10:1. В таблице 97

представлены R на пластинках "Силуфол" и с КСК для I - VI и окраска пятен.

Таблица 97

ВЕЛИЧИНА R И ЦВЕТ ПЯТЕН ОПРЕДЕЛЯЕМЫХ СОЕДИНЕНИЙ

┌──────────┬───────────────────┬──────────────────────────┬─────────┬─────┐

│Соединение│Проявляющий реагент│ Цвет пятен │"Силуфол"│ КСК │

├──────────┼───────────────────┼──────────────────────────┼─────────┼─────┤

│I │Прочный голубой Б │Желтый │0,63 │0,70 │

│II │То же │Розовый │0,38 │0,40 │

│III │ -"- │Сиреневый │0,49 │0,55 │

│IV │ -"- │Желтый │0,78 │0,85 │

│V │ -"- │Красный │0,44 │0,45 │

│VI │ -"- │Фиолетовый │0,59 │0,60 │

│I │Прочный синий Б │Желтый │0,63 │0,70 │

│II │То же │Розовый │0,38 │0,40 │

│III │ -"- │Сиреневый │0,49 │0,55 │

│IV │ -"- │Оранжевый │0,78 │0,85 │

│V │ -"- │Кирпично-красный │0,44 │0,45 │

│VI │ -"- │Фиолетовый │0,59 │0,60 │

│I - VI │Прочный красный Б │Ярко-малиновый разных │ │ │

│ │ │оттенков │ │ │

│I - VI │n-Нитроанилин │Бордо │ │ │

└──────────┴───────────────────┴──────────────────────────┴─────────┴─────┘

Обработка результатов анализа. Содержание фурадана и его метаболитов определяют, сравнивая площади и интенсивность окраски пятен стандартов и проб, или по площади пятен по формуле:

S - A

2 1

A = A - ------- (S - S),

2 S - S 2

2 1

где:

A - количество препарата, мкг;

S - площадь пятна определяемого вещества, кв. мм;

A , A , S , S - количества препарата и площади пятен (кв. мм)

1 2 1 2

стандартных растворов с явно большим и явно меньшим содержанием вещества по

сравнению с анализируемой пробой.

Количество фурадана и его метаболитов в пробе рассчитывают по формуле:

A = A + A + A + A + A + A .

мкг I II III IV V VI

Содержание фурадана (X, мг/кг или мг/л) рассчитывают по формуле:

X = -,

где:

P - масса анализируемой пробы, г.

Требования безопасности. Необходимо выполнять все требования безопасности работы с токсичными веществами, кислотами и щелочами.