"Методические указания по определению ЭФ-2 в воде и почве газожидкостной хроматографией" // Технорма.RU

Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

28 января 1980 г. N 2147-80

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ЭФ-2 В ВОДЕ И ПОЧВЕ

ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Е.И. Марциновского и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

1. Краткая характеристика препарата

ЭФ-2 - протравитель семян. Действующее начало препарата - 2-дихлор-метилен-3а-7а-дихлор-3а,4,7,7а-тетрагидро-4,7-метаноиндан-1,3-дион.

/│\ Cl O

H / │ \ __//

││ │H │ \ = CCl C H Cl O .

││H/ │__/ 2 11 6 4 2

H \ │ /Cl \\ Мол. масса 344,0.

\│/ O

ЭФ-2 в чистом виде - белые кристаллы с Т пл. 129 - 131 °С. Нерастворим

в воде. Растворимость при 20 °С в гептане 4,99, этаноле 5,96,

четыреххлористом углероде 168,7, ацетоне 185,7 мг/л, хорошо растворим в

-4

бензоле, толуоле, гексане. Упругость паров 3,088 х 10 мм рт. ст. при

-3

20 °С и 1,925 х 10 мм рт. ст. при 40 °С. ЛД для теплокровных 475 мг/кг.

ПДК в воде 0,01 мг/л, в почве еще не установлена.

2. Методика определения ЭФ-2 в почве и воде

газожидкостной хроматографией

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении фунгицида из воды гексаном, из почвы смесью ацетон - бензол (1:1) и газохроматографическом определении с использованием детектора по захвату электронов. Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

Диапазон определяемых концентраций в воде 0,002 мг/л + 0,04 мг/л

в почве 0,05 мг/кг + 1 мг/кг

Предел обнаружения в мкг - 0,0002

Предел обнаружения в воде - 0,002 мг/л

в почве - 0,05 мг/кг

Средние значения определения стандартных количеств, стандартные и средние стандартные отклонения для трех уровней концентраций представлены в таблице:

┌──────────────┬─────────────┬─────────┬────────┬───────────┬─────────────┐

│ Концентрация │Среднее зна- │Число па-│Стан- │Относитель-│Доверительный│

│ ЭФ-2, мг/л │чение опреде-│раллель- │дартное │ное │ интервал │

│ (для воды), │ления стан- │ных опре-│отклоне-│стандартное│среднего при │

│ мг/кг │дартных коли-│делений, │ние, │отклонение,│ р = 0,95 │

│ (для почвы) │честв С, % │n │ср. │отн., % │ и n = 5, % │

├──────────────┼─────────────┼─────────┼────────┼───────────┼─────────────┤

│ 1 │ 2 │ 3 │ 4 │ 5 │ 6 │

│Вода │ │ │ │ │ │

│0,004 │97,5 │5 │3,2 │4,0 │97,5 +/- 3,9 │

│0,01 │98,0 │4 │2,1 │3,4 │98,0 +/- 3,4 │

│0,02 │100,0 │4 │2,5 │3,9 │100,0 +/- 3,9│

│Почва │ │ │ │ │ │

│0,1 │95,0 │4 │1,05 │1,8 │95,0 +/- 1,8 │

│0,5 │96,0 │6 │2,3 │2,5 │96,0 +/- 2,5 │

│1,0 │97,0 │4 │2,4 │4,0 │97,0 +/- 3,8 │

└──────────────┴─────────────┴─────────┴────────┴───────────┴─────────────┘

2.1.2. Избирательность метода

Метод селективен; ДДТ, его метаболиты и линдан определению не мешают.

2.2. Реактивы и материалы

Бензол, ГОСТ 5955-74, хч, свежеперегнанный.

Ацетон, ГОСТ 2603-71, чда, свежеперегнанный.

Толуол, ГОСТ 5789-69, чда.

Гексан, ТУ 6-09-3375-73, перегнанный.

Натрий сернокислый безводный, ГОСТ 4166-76, хч.

Хроматон N-AW-ДMCS (фр. 0,20 - 0,25 мм) с 5% метилсиликона SE-30.

Азот особой чистоты газообразный, ГОСТ 9293-74.

Стандартный раствор ЭФ-2 в толуоле с концентрацией 1 мг/мл готовят растворением 0,0100 г ЭФ-2 в 10 мл растворителя.

Стандартные растворы ЭФ-2 в толуоле стабильны при хранении в холодильнике в течение 1 года.

2.3. Приборы, аппаратура и посуда

Хроматограф "Газохром-1106" с детектором по захвату электронов или аналогичный прибор.

Вакуумный ротационный испаритель.

Встряхиватель механический.

Хроматографическая колонка стеклянная длиной 150 см и внутренним диаметром 3 +/- 0,5 мм, заполненная хроматоном N-AW-ДMCS (0,20 - 0,25 мм) с 5% SE-30.

Воронка делительная ГОСТ 10054-75, на 1000 мл.

Колбы грушевидные с пришлифованной пробкой, ГОСТ 10394-72, емкость 100 мл.

Колбы от воронки Бюхнера, емкость 1000 и 250 мл.

Воронка Бюхнера, d 15 см.

Фарфоровая ступка с пестиком.

Воронка, ГОСТ 8613-73, d 80 мм.

Колбы конические плоскодонные, ГОСТ 10394-72, емкость 250 мл.

Вакуум-насос (водоструйный, масляный).

Электроплитка.

Набор сит "Физприбор".

Микрошприц на 10 мкл.

Секундомер.

2.4. Подготовка проб к анализу

Вода. Воду фильтруют от механических примесей и отбирают среднюю пробу (500 мл).

Почва. Из воздушно-сухого смешанного почвенного образца весом 1 кг методом квартования отбирается средняя проба. Средняя проба растирается в ступке и просеивается через сито 0,5 мм. Из просеянной пробы берется для анализа навеска 20 г.

2.5. Проведение определения

Вода [1]. Пробу воды (500 мл) помещают в делительную воронку и экстрагируют двумя порциями гексана по 30 мл. Объединенный экстракт сушат безводным сульфатом натрия и фильтруют в грушевидную колбу емкостью 100 мл. С помощью ротационного вакуумного испарителя полностью отгоняют растворитель. К сухому остатку пипеткой добавляют 10 мл ацетона. Колбу закрывают пробкой на шлифе и тщательно смывают стенки колбы растворителем. В хроматограф вводят 1 мкл полученного раствора.

Почва [1]. К 20 г средней пробы почвы добавляют 10 мл воды, помещают в коническую колбу с притертой пробкой и экстрагируют дважды смесью растворителей (20 мл бензола и 20 мл ацетона) при встряхивании в течение 30 мин. Почву отфильтровывают под вакуумом и объединенный экстракт переносят в колбу для отгонки, и растворители отгоняют досуха сначала на ротационном испарителе, затем в токе воздуха. К сухому остатку пипеткой добавляют 10 мл ацетона. Колбу закрывают пришлифованной пробкой и тщательно смывают стенки колбы растворителем. В хроматограф вводят 2 мкл полученного раствора.

Условия хроматографирования [2]

Хроматограф с детектором по захвату электронов;

-11

Рабочая шкала электрометра 10 А;

Скорость протяжки картограммы самописца 600 мм/час;

Колонка стеклянная спиральная длиной 1,5 м и внутренним диаметром 3 +/- 0,5 мм, заполненная хроматоном N-AW-ДМСS (0,2 - 0,25 мм) с 5% SE-30;

Температура термостата испарителя 250 °С, колонки 200 °С, детектора 230 °С;

Расход газа-носителя (азот особой чистоты) в мл/мин. через колонку 40 +/- 2; через продувочную камеру детектора 60 +/- 2;

Линейность детектирования от 0,02 - 4 нг;

Объем, вводимый в испаритель, 2 мкл;

Минимально детектируемое количество 0,2 нг;

Абсолютное время удерживания ЭФ-2 1 мин. 55 сек. +/- 5 сек.;

Время удерживания хлорорганических пестицидов в этих условиях:

линдан 1 мин. 12 с

гептахлор 3 мин. 6 с

пп'ДДЕ 7 мин. 12 с

пп'ДДД 9 мин. 12 с

пп'ДДТ 11 мин. 54 с.

Хроматографирование проводят дважды. На хроматограммах измеряют высоты пиков, соответствующих ЭФ-2, вычисляют среднее значение из двух параллельных определений. Количественное определение проводят по методу абсолютной калибровки. Для построения градуировочного графика готовят 10 искусственных смесей. Для этого в пробирки помещают 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20, 25 и 30 мкл стандартного раствора ЭФ-2. К указанным количествам стандартного раствора приливают по 10 мл толуола и по 2 мкл полученных растворов, содержащих соответственно 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1; 2; 3; 4; 5 и 6 нг ЭФ-2, хроматографируют при указанных выше условиях. На хроматограммах измеряют высоты пиков ЭФ-2 и строят график зависимости этих высот в мм от количества ЭФ-2 в нг.

Альтернативные условия хроматографирования [2]

Колонка длиной 1 м, внутренним диаметром 3 мм заполнена хроматоном N-AW-HMDS (0,125 - 0,160 мм) с 3,5% DOW-200 + 1,5% QF-1.

Т. колонки 190 °С, Т. испарителя 200 °С, Т. детектора 220 °С. В этих условиях времена удерживания:

альфа-ГХЦГ - 1 мин. 3 с

линдана - 1 мин. 10 с

ЭФ-2 - 2 мин.

гептахлора - 2 мин. 45 с

пп'ДДЕ - 5 мин. 3 с

пп'ДДД - 6 мин. 43 с

пп'ДДТ - 8 мин. 38 с.

2.6. Обработка результатов анализа

Содержание ЭФ-2 в пробе в мг/кг или мг/л вычисляют по формуле:

A х V

X = ----------, мг/кг (мг/л),

V х P х R

где:

A - количество ЭФ-2, найденное в аликвоте по градуировочному графику,

в нг;

V - объем вводимой в хроматограф аликвоты в мкл (2 мкл);

V - общий объем пробы в мл (10 мл);

P - навеска анализируемой пробы в г или объем воды в мл;

R - пересчетный коэффициент, учитывающий сорбцию ЭФ-2 почвы во времени.

Определяют предварительно для разного типа почв.

3. Требования безопасности

При работе соблюдать правила безопасности, принятые для работы с легколетучими жидкостями, а также требования техники безопасности, регламентируемые инструкцией по эксплуатации приборов с источниками радиоактивного излучения.

4. Литература

1. К.Ф. Новикова, Л.И. Лещинская.

"Определение остаточных количеств ЭФ-2 в зерне и воде методом газожидкостной хроматографии с использованием детектора по захвату электронов".

Химия в с.х. N 4, 61 - 63, 1975 г.

5. Авторы

Настоящие Методические указания включают разработку авторских коллективов:

1. И.И. Пиленкова, Р.Г. Юркова.

Уфимский филиал ВНИИ химических средств защиты растений, г. Уфа.

2. К.Ф. Новикова, Л.И. Лещинская.

ВНИИ химических средств защиты растений, г. Москва.

6. Дополнения

Настоящие Методические указания рекомендованы в добавление к "Определению остаточных количеств ЭФ-2 в зерне методом газожидкостной хроматографии с детектором по захвату электронов", разработанному Новиковой К.Ф., Лещинской Л.И., утвержденному МЗ СССР 22 сентября 1975 г., N 1350-75, опубликованному в МУ, часть VII, стр. 24 - 28, 1976 г.