"Методические указания по определению неорона в меде методом газовой хроматографии" // Технорма.RU

Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

28 января 1980 г. N 2126-80

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ НЕОРОНА В МЕДЕ МЕТОДОМ ГАЗОВОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Е.И. Марциновского и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

1. Характеристика препарата

Неорон - изопропиловый эфир 4,4-дибромбензойной кислоты.

COO(CH )

│ 3 2

--- │ ---

Br--// \\--C--// \\--Br

\ ___ / │ \ ___ /

--- │ ---

Эмпирическая формула - C H O Br .

17 16 3 2

Молекулярная масса - 428,13.

Синонимы: А-2529, А-2443.

Технический продукт - твердое вещество кремового цвета. Давление паров

-7

- 5,5 х 10 мм рт. ст. при 20 °С. Плохо растворяется в воде, хорошо в

большинстве органических растворителей. Стабилен при высокой температуре,

нестоек в кислой и щелочной средах. Выпускается в форме 25- и

50-процентного концентрата эмульсии. Неорон относится к малотоксичным

соединениям. ЛД его при введении в желудок крысам составляет 1,5 - 5

г/кг. Применяется неорон в качестве инсекто-анарицида на хлопчатнике.

Перспективен в борьбе с вредителями садов и варроатозом пчел.

2. Методика определения неорона в меде

способом газовой хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на экстракции неорона ацетоном, перераспределении его в гексан, очистке последнего в статических условиях смесью силикагеля и окиси алюминия и идентификации пестицида способом газовой хроматографии с детектором постоянной скорости рекомбинации.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Диапазон определяемых концентраций - 0,25 - 25 мкг неорона в анализируемой пробе.

Предел обнаружения - 0,025 мг/кг.

Полнота определения - 77,81%.

Стандартное отклонение - 10,4.

Относительное стандартное отклонение - 0,15.

Доверительный интервал - 6,24.

2.2. Реактивы и материалы

Ацетон, чда, ГОСТ 2603-63.

Гексан, ч, ТУ 6-09-3375-73.

Бензол, чда, ГОСТ 5955-68.

Натрий сернокислый безводный, ч, ГОСТ 4166-66.

Окись алюминия для хроматографии, ч, 2 степени активности, МРТУ 6-09-5296-68.

Силикагель КСК (или КСС) обрабатывают методом, общепринятым для тонкослойной хроматографии. Продажный силикагель заливают на 20 часов соляной кислотой (1:1), затем промывают водой и кипятят с разведенной азотной кислотой (1:1) в течение 2 - 3 часов. Промывают горячей водопроводной, а затем дистиллированной водой до нейтральной реакции и до удаления следов хлоридов (промывные воды контролируются азотнокислым серебром).

Промытый силикагель сушат при 140 °С 6 часов, дробят и просеивают через сито 100 меш.

Вода дистиллированная.

Смесь экстрагентов - бензол 3 части и гексан 1 часть.

Хроматон N-AW-DMCS с 5% SE-30 (или ДС-550).

Стандартный раствор неорона.

а) Отвешивают 10 мг неорона в мерную колбу на 100 мл. Неорон растворяют в гексане и доводят его до метки. Получается основной стандартный раствор с содержанием неорона 100 мкг в 1 мл.

б) Из основного раствора готовят рабочий стандартный раствор неорона, содержащий 1 мкг препарата в 1 мл. Для этого в мерную пробирку на 10 мл с притертой пробкой отмеривают 0,1 мл основного стандартного раствора и доводят объем жидкости до 10 мл.

2.3. Приборы и посуда

Газовый хроматограф "Цвет-106" с детектором постоянной скорости рекомбинации. (Допускается использование другого типа хроматографа с детектором по захвату электронов.)

Вытяжной шкаф.

Воронки делительные - на 100 и 200 мл.

Стаканы химические - на 50 мл.

Воронки химические - диаметр 5 и 3 см.

Цилиндры мерные - на 50 и 10 мл.

Пробирки мерные - цена деления 0,1 мл.

2.4. Ход анализа

Отбирают среднюю пробу меда в соответствии с имеющимися инструкциями. 10 г меда растворяют в 10 мл дистиллированной воды. Раствор переносят в делительную воронку. Стакан ополаскивают 30 мл ацетона и сливают его в ту же делительную воронку. Содержимое перемешивают 3 минуты. После разделения жидкости нижний слой (водный раствор сахаров) отбрасывают. Верхний слой (ацетоновый экстракт) переносят в другую делительную воронку и прибавляют 70 мл дистиллированной воды. Неорон реэкстрагируют из водно-ацетонового раствора 2 раза гексаном, используя каждый раз по 10 мл экстрагента. Для этого смесь перемешивают в делительной воронке каждый раз по 3 минуты. Гексан (последовательными порциями) фильтруют через воронку со слоем безводного сернокислого натрия в выпаривательную чашку. Воронку заправляют следующим образом: в суживающуюся часть воронки диаметром 5 см вводят тампон из белой ваты (50 мг) и насыпают слой безводного сернокислого натрия - 1 - 1,5 см. Перед использованием воронку промывают 5 мл гексана, который отбрасывают. После окончания фильтрации исследуемого экстракта воронку промывают 5 мл гексана, который сливают в выпаривательную чашку.

В выпаривательную чашку с гексаном добавляют по 200 мг силикагеля и окиси алюминия. После этого гексан выпаривают под тягой вытяжного шкафа при комнатной температуре. Пестициды вымывают из сухого остатка смесью бензола с гексаном - 3:1. Сначала в чашку приливают 3 мл смеси и перемешивают содержимое стеклянной палочкой 1 минуту. Надосадочную жидкость отфильтровывают через воронку со слоем безводного сернокислого натрия в мерную пробирку. (Воронка диаметром 3 см. В суживающуюся часть воронки вводят тампон из белой ваты - 30 мг и насыпают слой безводного сернокислого натрия - 0,75 см.) Осадок в чашке и фильтр промывают еще 2 раза, используя каждый раз по 2 мл смеси бензол - гексан. Очищенный таким образом экстракт используют для газохроматографического анализа. При необходимости полученный экстракт можно сконцентрировать до объема 2 мл и вводить в хроматограф до 10 мкл жидкости.

2.5. Условия хроматографирования

Идентификацию неорона в экстракте проводят на газовом хроматографе "Цвет 106" с детектором постоянной скорости рекомбинации. Допускается использование других приборов с различными вариантами электронно-захватного детектора. Подготовка прибора к работе производится в соответствии с его техническими требованиями. В качестве газа-носителя и на продувку детектора используют азот особой чистоты.

Расход газа:

на колонку - 40 мл/мин.

на продувку детектора - 80 мл/мин.

Режим работы прибора: температура испарителя - 230 °С, температура колонки - 220 °С, температура детектора - 250 °С.

В испаритель хроматографа вводят до 10 мкл стандартного раствора или очищенного экстракта. Время удерживания неорона на колонке - 9 - 10 минут. Линейный динамический диапазон выдерживается в пределах от 0,5 до 10 нг препарата во введенной в испаритель пробе.

2.6. Обработка результатов анализа

Количественное определение неорона производится путем сравнения высоты пиков опытной пробы и стандартного раствора по следующей формуле:

V х Ст х H х 100

пр пр

X = --------------------,

V х H х M х K

вв ст пр

где:

X - количество пестицида в пробе в мг на 1 кг;

V - объем экстракта в мл;

пр

Ст - количество пестицида в нг, введенное в испаритель хроматографа со

стандартным раствором;

H - высота пика стандартного образца (в см);

ст

V - количество экстракта, введенного в хроматограф (в мкл);

вв

H - высота пика испытуемой пробы (в см);

пр

M - масса пробы, взятой для экстракции (в г);

пр

100

--- - коэффициент для внесения поправки на потери пестицида при

экстракции и в процессе подготовки пробы к исследованиям, где K -

определяемость неорона в % - 77,8%.

3. Требования безопасности

Соблюдаются правила по технике безопасности в химических лабораториях.

Настоящие Методические указания разработаны О.А. Малининым и В.И. Ярошенко (Лаборатория фармакологии с токсикологией УНИИЭВ. г. Харьков. Зав. отделом - Академик ВАСХНИЛ И.Н. Гладенко).