"Методические указания по определению витамицина А в воздухе методом тонкослойной хроматографии" // Технорма.RU

Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

19 октября 1979 г. N 2071-79

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ВИТАМИЦИНА А В ВОЗДУХЕ

МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Е.И. Марциновского и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

Настоящие Методические указания распространяются на метод определения витамицина А в воздухе рабочей зоны при проведении сельскохозяйственных работ.

1. Краткая характеристика препарата

Витамицин А - соединение, образуемое актиномицетом оранжевой группы Act. aureoverticillatus, относится к типу пиррил-дипиррил метеновых соединений. Структурная формула (Хохлова и др., 1964 г.):

OCH R R

│ 3 │1 │2

┌┬─┬┐ ┌┬──┐ ┌───┐

││ ││ ││ │ │───│

││ ││ ││ │ │ │

\ /--\ /\ //\ //-R R + R + R = C H .

\ / \ / \/ \// 3 1 2 3 11 23

N N CH N

│

Суммарная формула: C H N O. Молекулярная масса 393. Точка плавления

25 35 3

192 - 194°. По внешнему виду витамицин А представляет собой

оранжево-красные призматические кристаллы. Витамицин А хорошо растворим в

органических растворителях, нерастворим в воде.

Витамицин А является основным действующим началом препарата витамицина, применяющегося для повышения продуктивности животных и птиц.

ПДК в воздухе рабочей зоны 0,001 мг/куб. м.

2. Методика определения витамицина А в воздухе методом тонкослойной хроматографии

2.1. Общие положения

2.1.1 Принцип метода.

Метод основан на хроматографировании витамицина в тонком слое силикагеля в системе хлороформ - метанол (9:1) после экстракции с фильтров АФА-ХП-18 или АФА-ВП-10 этиловым спиртом, упаривании досуха и растворении в хлороформе.

Зоны локализации обнаруживаются визуально в виде розовых пятен.

2.1.2. Метрологическая характеристика опыта.

Диапазон определяемых концентраций от 0,2 мкг/куб. м до 3 мг/куб. м.

Чувствительность определения - 0,01 мкг в пятне.

Среднее значение определения стандартных препаратов витамицина 85%. Стандартное отклонение - 8,5%. Относительное стандартное отклонение - 2,6%.

Вещества, входящие в состав препарата, не мешают определению.

2.2. Реактивы и растворы

Этиловый спирт, ГОСТ 10749-64.

Хлороформ, х.ч., ГОСТ 3160-51.

Метанол, х.ч., ГОСТ 6995-67.

Ацетон, ГОСТ 2603-71.

Стандартный раствор витамицина А с содержанием 40 мкг/мл: 0,0020 г витамицина А растворяют в хлороформе в мерной колбе емкостью 50 мл.

Рабочий раствор витамицина А с содержанием 4 мкг/мл: готовится из стандартного раствора.

2.3. Приборы и посуда

Воронки делительные, ГОСТ 8613-64, на 50 мл.

Микропипетки, ГОСТ 1777-64.

Колбы грушевидные емкостью 25 мл, ГОСТ 10394-63.

Цилиндры мерные на 10 мл.

Палочки стеклянные.

Камера для хроматографирования, ГОСТ 10565-63.

Хроматографические пластинки "Силуфол" производства ЧССР.

Весы аналитические, тип АДВ-200 м.

Испаритель ротационный, ГОСТ 1911-59.

Фильтры АФА-ХП-18, АФА-ВП-10.

2.4. Ход анализа

2.4.1. Отбор проб воздуха.

Воздух протягивают со скоростью 10 л/мин. через фильтр АФА-ХП-18 или АФА-ВП-10. Для анализа необходимо 50 л воздуха.

2.4.2. Экстракция витамицина с фильтров.

Фильтр переносят в делительную воронку на 25 мл, заливают 5 мл этилового спирта и экстрагируют 10 минут. Экстракт сливают в грушевидную колбу для отгонки, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр промывают еще раз 5 мл этилового спирта. Экстракты объединяют, упаривают на ротационном испарителе досуха. Сухой остаток растворяют в 0,5 - 1,0 мл хлороформа и проводят хроматографическое определение витамицина.

2.4.3. Условия хроматографирования.

Разрезанную пластинку "Силуфол" размером 70 х 50 мм помещают в камеру, насыщенную ацетоном, и дают подняться растворителю до конца пластинки. Затем пластинку высушивают на воздухе.

На промытую ацетоном пластинку наносят стандартные растворы витамицина

А в количестве 0,04; 0,08; 0,16 мкг (соответственно 10, 30, 40 мкл) и

растворы анализируемого препарата 10 - 50 мкл. Пластинку помещают в камеру

для хроматографирования с подвижным растворителем (хлороформ:метанол 9:1).

После подъема фронта растворителя на высоту 6 см хроматографирование

прекращают. Затем пластинку вынимают и сушат на воздухе. Время разделения

10 - 15 мин. (R = 0,35 - 0,38). О наличии витамицина в пробе

свидетельствует появление на хроматограмме двух розовых пятен. Содержание

витамицина А определяют по нижнему пятну, площадь пятна определяют

денситометрически.

2.4.4. Обработка результатов анализа.

Расчет витамицина производят по формуле:

С х S

Х = -------,

S х V

о о

где:

Х - содержание витамицина в пробе в мг/куб. м;

С - количество витамицина в стандарте в мкг;

S - площадь пятна пробы, кв. мм;

S - площадь пятна стандарта, кв. мм;

V - объем пропущенного через фильтр воздуха, приведенный к

атмосферному давлению 760 мм рт. ст. и 20 °С;

или:

Х = -,

где:

Х - содержание витамицина в воздухе, мг/куб. м;

А - содержание в-ва в пробе в мкг;

V - объем воздуха, отобранный для анализа, в литрах.

3. Требования безопасности

Соблюдаются требования безопасности, рекомендованные для работы с органическими растворителями и бактериальными препаратами.

4. Настоящие Методические указания разработаны Е.Б. Кругляк, С.Г. Билуши (ВНИИбакпрепарат, Москва), Н.М. Кузенко (ВНИИгинтокс, Киев).